凝膠滲透色譜儀是一種基于分子尺寸差異進(jìn)行物質(zhì)分離的色譜分析儀器,廣泛應(yīng)用于聚合物分子量及其分布的測(cè)定,是材料科學(xué)、化學(xué)工程、生物制藥及環(huán)境監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域的重要分析工具。其分離原理基于體積排除效應(yīng)。色譜柱中填充了多孔性凝膠或微粒,其孔徑大小與待分離的聚合物分子尺寸相近。當(dāng)樣品溶液流經(jīng)色譜柱時(shí),大分子因無法進(jìn)入凝膠孔隙而優(yōu)先從凝膠粒間流出,淋出體積(時(shí)間)最小;小分子則能進(jìn)入孔隙,路徑延長(zhǎng),淋出體積較大。通過這一機(jī)制,聚合物按分子量從大到小依次淋出,實(shí)現(xiàn)分離。
1、分離能力:
分離度(RS):是衡量GPC柱對(duì)分子量不同的高聚物分離能力的關(guān)鍵指標(biāo)。國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定分離度為兩個(gè)相鄰色譜峰的分離程度,以兩個(gè)組分的保留值之差與其平均峰寬之比表示。當(dāng)分離度RS=1.5時(shí),兩峰完q分離;RS=1.0時(shí),兩峰有較明顯的分離。
影響因素:分離度與凝膠填料的孔徑大小和孔徑分布、溶質(zhì)分子量分布以及填料填裝程度的好壞密切相關(guān)。此外,色譜柱的理論塔板數(shù)(N)雖不能全面反映色譜柱性能,但柱效高低仍與分離度息息相關(guān)。
2、重復(fù)性:
定義:實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重現(xiàn)性是評(píng)估GPC系統(tǒng)穩(wěn)定性的重要指標(biāo)。高重復(fù)性意味著在相同條件下多次進(jìn)樣能得到一致的結(jié)果。
影響因素:這要求GPC系統(tǒng)具有精確的流量控制和穩(wěn)定的色譜柱性能。例如,通過優(yōu)化輸液泵、脫氣機(jī)腔體、柱溫箱等單元的設(shè)計(jì),可以提高系統(tǒng)的溶劑輸送穩(wěn)定性,從而獲得更好的重復(fù)性。
3、柱效:
定義:色譜柱的理論塔板數(shù)(N)是衡量柱效的重要參數(shù)。柱效越高,分離效果越好。
影響因素:柱效與柱填料粒度尺寸、流動(dòng)相流速、柱子規(guī)格、溶質(zhì)分子的擴(kuò)散程度以及填裝的緊密程度等因素有關(guān)。較小的填料粒徑可以提供更高的柱效和分辨率,但通常需要較高的操作壓力。
4、檢測(cè)靈敏度:
定義:檢測(cè)靈敏度是衡量GPC系統(tǒng)檢測(cè)低濃度樣品能力的指標(biāo)。高靈敏度意味著系統(tǒng)能夠檢測(cè)到更低濃度的樣品。
影響因素:檢測(cè)靈敏度與檢測(cè)器的類型和性能密切相關(guān)。例如,示差折光檢測(cè)器(RI)對(duì)光學(xué)模塊的溫控進(jìn)行了優(yōu)化,可以獲得穩(wěn)定的基線信號(hào),從而提高檢測(cè)靈敏度。此外,采用發(fā)光二極管作為光源的示差折光檢測(cè)器,由于不產(chǎn)生熱量,使檢測(cè)器的穩(wěn)定性大為改觀,進(jìn)一步提高了檢測(cè)靈敏度。
5、溫控與流速控制:
溫控:GPC系統(tǒng)對(duì)溫度的控制非常嚴(yán)格。例如,示差折光檢測(cè)器的參比池和樣品池間的溫差需要控制在極小的范圍內(nèi),以滿足控溫精度要求。此外,柱溫箱的溫度控制也對(duì)分離效果和重復(fù)性有重要影響。
流速控制:泵系統(tǒng)需要維持恒定的流速,以確保樣品在色譜柱中的均勻分離。流速的波動(dòng)會(huì)影響分離效果和重復(fù)性。因此,高精度的流量控制是GPC系統(tǒng)的核心性能之一。
6、操作便利性:
自動(dòng)化程度:現(xiàn)代GPC系統(tǒng)通常具備較高的自動(dòng)化程度,如自動(dòng)取樣器、自動(dòng)進(jìn)樣、自動(dòng)清洗等功能,可以顯著提高實(shí)驗(yàn)效率并減少人為誤差。
用戶界面:友好的用戶界面和便捷的操作軟件也是提高操作便利性的重要因素。用戶可以通過軟件輕松設(shè)置實(shí)驗(yàn)參數(shù)、監(jiān)控實(shí)驗(yàn)進(jìn)程并處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
